Estude fácil! Tem muito documento disponível na Docsity
Ganhe pontos ajudando outros esrudantes ou compre um plano Premium
Prepare-se para as provas
Estude fácil! Tem muito documento disponível na Docsity
Prepare-se para as provas com trabalhos de outros alunos como você, aqui na Docsity
Os melhores documentos à venda: Trabalhos de alunos formados
Prepare-se com as videoaulas e exercícios resolvidos criados a partir da grade da sua Universidade
Responda perguntas de provas passadas e avalie sua preparação.
Ganhe pontos para baixar
Ganhe pontos ajudando outros esrudantes ou compre um plano Premium
Comunidade
Peça ajuda à comunidade e tire suas dúvidas relacionadas ao estudo
Descubra as melhores universidades em seu país de acordo com os usuários da Docsity
Guias grátis
Baixe gratuitamente nossos guias de estudo, métodos para diminuir a ansiedade, dicas de TCC preparadas pelos professores da Docsity
Um estudo observacional sobre a presença de neutrófilos pseudo-pelger-huët (npph) em pacientes com úlcera crônica (uc) e síndrome mielodisplásica (smd). O estudo compara amostras de sangue periférico (sp) e medula óssea (mo) de pacientes com smd e ucmi, utilizando o teste t não pareado. Os resultados revelam que a média de idade dos pacientes com smd e ucmi é semelhante, mas a porcentagem de npph observada em mo é maior do que em sp nos pacientes com smd. A conclusão é que pacientes com ucmi apresentam npph em uma proporção semelhante aos pacientes com smd.
O que você vai aprender
Tipologia: Notas de estudo
Compartilhado em 07/11/2022
4.4
(172)415 documentos
1 / 28
Esta página não é visível na pré-visualização
Não perca as partes importantes!
Niterói 2019
Trabalho de Conclusão de Curso apresentado à Universidade Federal Fluminense (UFF), como parte das exigências para a obtenção da habilitação em Análises Clínicas (Biomedicina). Orientadora: Profª Drª Hye Chung Kang Niterói 2019
Introdução: Os neutrófilos são o grupo de leucócitos predominantes na circulação e possuem uma grande importância na atuação em processos infecciosos e inflamatórios. Eles podem sofrer alterações morfológicas que podem ou não comprometer a sua funcionalidade. A disgranulopoiese é um termo utilizado para designar um grupo de alterações displásicas nas células da linhagem granulocítica, dentre elas pode-se destacar os neutrófilos hiposegmentados que podem apresentar dois segmentos unidos por um único filamento fino ou muitas vezes não segmentam, sendo também conhecida como neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët (NPPH). Esse tipo de alteração é frequentemente observado em pacientes com suspeita de Síndrome Mielodisplásica (SMD), sendo então considerado um padrão displásico. Há vários estudos recentes que mostram a atuação ativa dos neutrófilos em processos inflamatórios crônicos como em úlcera crônica de membros inferiores (UCMI). Devido essa atuação ativa dos neutrófilos, nesses casos, coloca-se em questão se essa hiperatividade pode levar ao desenvolvimento de padrões displásicos em pacientes com UCMI. Objetivo: avaliar a presença de NPPH em pacientes com UCMI e com SMD, comparando-os e avaliando a sua frequência. Material e Métodos: esse é um estudo observacional, transversal e descritivo que visa averiguar a presença de NPPH em pacientes com UCMI e com SMD. O material utilizado neste trabalho foi obtido a partir de dois projetos distintos onde os pacientes foram recrutados no Hospital Universitário Antônio Pedro (HUAP), receberam esclarecimento sobre as pesquisas e assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Para isso foram selecionadas lâminas de cada paciente, nos casos de SMD foram selecionadas as de sangue periférico (SP) e de medula óssea (MO). Cada material foi analisado no microscópio óptico realizando a contagem do número de lobos observados em cada neutrófilo com o seguinte critério: 1, 2, 3, 4 e 5 ou mais. Após isso foi realizado um estudo estatístico no programa GraphPad Prism 5 versão 5.02. O teste T não pareado foi utilizado para a comparação do grupo de SMD com UCMI e também para comparar os dados obtidos na análise de SP e MO dos pacientes com SMD. Os valores foram considerados estatisticamente significativos quando p for menor ou igual a 0,05. Resultados: os dados obtidos durante o estudo revelaram que a média de idade dos pacientes com SMD foi de 62,1 anos e na população com UCMI foi de 63,9 anos. Ao avaliar o grupo com SMD em relação ao grupo com UCMI é possível observar que não há diferenças significativas entre os valores de NPPH (p = 0,1350). Na população com SMD foram comparados o número de NPPH observados na MO e no SP, revelando uma diferença significativa nos resultados obtidos (p = 0,019). É possível concluir que há diferenças significativas entre os tipos de amostra, com o predomínio de NPPH na MO. Conclusão: Na abordagem da presença de NPPH na população com UCMI é possível avaliar que há valores consideráveis dessas células com alterações displásicas e nas amostras de MO e de SP dos pacientes com SMD avaliou-se que na MO há uma maior porcentagem dessas células com alterações. Palavras-chaves: úlcera crônica, Síndrome Mielodisplásica e neutrófilos Pseudo- Pelger-Huët.
Introduction: Neutrophils are the predominant group of leukocytes in the circulation and have a great importance in acting in infectious and inflammatory processes. They may undergo morphological changes that may or may not compromise their functionality. Dysgranulopoiesis is a term used to denote a group of dysplastic changes in granulocytic lineage cells, among them the hyposegmented neutrophils that may have two segments joined by a single thin or often non-segmental filament, also known as neutrophils Pseudo-Pelger-Huët (NPPH). This type of alteration is frequently observed in patients with suspected myelodysplastic syndrome (MDS), and is therefore considered a dysplastic pattern. There are several recent studies showing the active role of neutrophils in chronic inflammatory processes such as chronic lower limb ulcers (CLLU). Due to this active role of neutrophils in these cases, it is questioned whether this hyperactivity may lead to the development of dysplastic patterns in patients with CLLU. Objective: to evaluate the presence of NPPH in patients with CLLU and MDS, comparing and evaluating their frequency. Material and Methods: this is an observational, cross-sectional and descriptive study that aims to verify the presence of NPPH in patients with CLLU and MDS. The materials used in this study were obtained from two different projects where patients were recruited at the University Hospital Antônio Pedro (UHAP) and received clarification on the research and signed the Informed Consent Form. For this, slides were selected from each patient; in cases of MDS, peripheral blood (PB) and bone marrow (BM) were selected. Each material was analyzed under the optical microscope by counting the number of lobes observed in each neutrophil with the following criteria: 1, 2, 3, 4 and 5 or more. After this, a statistical study was performed using GraphPad Prism 5 version 5.02. The unpaired t test was used to compare the MDS group with CLLU and also to compare the data obtained in the PB and BM analysis of patients with MDS. Values were considered statistically significant when p is less than or equal to 0.05. Results: The data obtained during the study revealed that the mean age of patients with MDS was 62.1 years and in the population with CLLU was 63.9 years. When evaluating the group with MDS in relation to the group with CLLU it can be observed that there are no significant differences between the NPPH values (p = 0.1350). In the population with MDS were compared the number of NPPH observed in BM and PB, revealing a significant difference in the results obtained (p = 0.019). It can be concluded that there are significant differences between the sample types, with the predominance of NPPH in BM. Conclusion: in addressing the presence of NPPH in the population with CLLU, it is possible to evaluate that there are considerable values of these cells with dysplastic alterations and in the BM and PB samples of patients with MDS, it was evaluated that in BM there is a higher percentage of these cells with alterations. Keywords: chronic ulcer, myelodysplastic syndrome and neutrophils Pseudo- Pelger-Huët.
Figura 1 Alterações na medula óssea e no sangue periférico que podem caracterizar a disgranulopoiese
Figura 2 Neutrófilos com alteração na segmentação (Pseudo-Pelger- Huët) e com segmentação normal em sangue periférico
Figura 3 Fotos de Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huet observados na medula óssea e no sangue periférico
Figura 4 Comparação da porcentagem de neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët em sangue periférico de pacientes com SMD e UCMI
Figura 5 Comparação da porcentagem de neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët em SP e MO nos pacientes com SMD
Hb - Hemoglobina IC - Inflamação Crônica MO - Medula Óssea NNPPH - Neutrófilos não Pseudo-Pelger-Huët NPPH - Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët PIC - Processo Inflamatório Crônico PPH - Pseudo-Pelger-Huët PPHA - Pseudo-Pelger-Huët adquirida SMD - Síndrome Mielodisplásica SP - Sangue Periférico TCLE - Termo de Consentimento Livre e Esclarecido UC - Úlcera crônica UCMI - Úlcera Crônica de Membros Inferiores
Os neutrófilos são o grupo predominante de leucócitos na circulação de um adulto saudável e em recém-nascidos. O seu aumento pode indicar processos infecciosos e inflamatórios agudos e sua diminuição pode ser observada em situações como infecções por certos vírus, parasitoses e malignidades. Em processos infecciosos, a medula aumenta a produção de leucócitos e lança na corrente sanguínea neutrófilos jovens recém-produzidos, pois não há tempo suficiente para o seu amadurecimento devido à alta demanda por essas células (AMULIC et al., 2012). Essa situação é chamada de desvio à esquerda, porque, ao realizar o hemograma, a listagem dos diferentes tipos de leucócitos e os seus valores são colocados em ordem progressiva de maturação da esquerda para direita. Como os bastonetes costumam estar à esquerda na lista, quando há um aumento do seu número, dizemos que há um desvio para a esquerda (HOFFBRAND, A. V. - MOSS, 2013). Algumas alterações morfológicas podem ser observadas nessas células durante processos inflamatórios e em malignidades. A disgranulopoiese é um termo utilizado para designar um grupo de alterações displásicas observadas nas células da linhagem granulocítica, que podem indicar alguma anormalidade (figura 1). Pode-se destacar algumas modificações como, a diminuição de grânulos na célula que é definida quando há redução de 2/3 da quantidade de grânulos (GOASGUEN et al., 2014) e agregação anormal da cromatina que são identificados como a condensação de cromatina em grandes partes separados por zonas claras (GOASGUEN et al., 2014). Outra alteração que pode ser observada são os neutrófilos hiposegmentados (Pseudo-Pelger-Huët), que apresentam um padrão nuclear hipercondensado, muitas vezes não segmentam ou apresentam dois segmentos unidos por um único filamento fino (GOASGUEN et al. , 2014), sendo também chamado de neutrófilos bilobados. (figura 2)
Figura 1 - Alterações na medula óssea e no sangue periférico que podem caracterizar a disgranulopoiese. Sangue Periférico Medula Óssea Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët Anisocitose Neutrófilos Hipogranulares Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët Blastos Hipersegmentação nuclear Formatos de núcleos diferentes Células de linhagem granulocítica hipogranulares (Fonte: INVERNIZZI, 2015) Figura 2 – Neutrófilos com alteração na segmentação (Pseudo-Pelger-Huët) e com segmentação normal em sangue periférico. A e B) Neutrófilos com segmentação alterada com um único lobo e bilobado, respectivamente. C) Neutrófilos com segmentação normal. (WANG et al. , 2011) O termo Pelger-Huët foi descrito primeiramente por dois médicos que o designaram com os seus respectivos nomes. Eles observaram essa alteração no núcleo dos neutrófilos em pacientes com tuberculose. Prosseguindo com os estudos, avaliaram que se tratava de uma anomalia hereditária, pois o mesmo padrão foi encontrado em outros membros da família sem tuberculose (CUNNINGHAM et al ., 2009). Com o avanço da pesquisa observou-se que neutrófilos hiposegmentados também eram observados em pacientes com
tipo PPHA nesses casos. Assim, nesse estudo lâminas de pacientes portadores de úlcera crônica de membros inferiores (UCMI) serão utilizadas como modelo de PIC. A UCMI é muito comum em pacientes com idade superior a 65 anos, geralmente acomete o lado medial da parte inferior do membro entre o joelho e o tornozelo. Normalmente está associada à insuficiência venosa crônica e à hipertensão venosa (ŽULEC et al. , 2019). Alguns estudos relatam que o surgimento da inflamação crônica (IC) nos casos de insuficiência venosa está associada ao aprisionamento de neutrófilos ativados, que secretam proteases e degradam fatores de crescimento, receptores e matriz extracelular, ocasionando uma maior destruição tecidual. Assim, a inflamação persistente resulta no retardo do avanço para a cicatrização (MCDANIEL; ROY; WILGUS, 2013). O tratamento para esse tipo de úlcera é bem difícil, muitos pacientes podem conviver com a lesão durante anos, realizando o tratamento da ferida com a orientação de um profissional (ŽULEC et al. , 2019). Devido a essa atuação ativa dos neutrófilos, nesses casos, coloca-se em questão se essa hiperatividade pode levar ao desenvolvimento de padrões displásicos. A alteração morfológica nos neutrófilos conhecida como Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët, é um assunto pouco abordado na literatura e em uma pesquisa rápida nos principais sites de procura de artigos observa-se a presença de poucos estudos sobre esse assunto. Assim, o objetivo deste trabalho é dar uma maior ênfase para esse assunto e avaliar essas alterações em dois diferentes casos. Com base nesses questionamentos, o presente estudo visa observar em lâminas de SP de pacientes com UCMI neutrófilos hiposegmentados (Pseudo- Pelger-Huët), comparando com lâminas de SP e de MO de pacientes com SMD, já que nesses casos esse tipo de alteração normalmente é encontrado. Assim, a hipótese deste estudo é que em casos de UCMI pode-se observar NPPH. Com isso, surge o questionamento se a presença de alterações nucleares como a hiposegmentação de neutrófilos têm maior associação com fatores intrínsecos à célula ou à resposta do organismo.
Esse estudo visa realizar uma revisão sobre as alterações nucleares dos neutrófilos em processos inflamatórios crônicos e em malignidades e avaliar a segmentação nuclear dos neutrófilos em portadores de UCMI, como modelo de PIC, e em pacientes com SMD, como modelo de malignidade. 2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS ● Identificar e quantificar a segmentação nuclear dos neutrófilos em lâminas de sangue periférico em pacientes com UCMI. ● Identificar e quantificar segmentação nuclear dos neutrófilos em lâminas de sangue periférico e de medula óssea de pacientes com suspeita de SMD. ● Comparar os resultados observados nas lâminas de sangue periférico dos pacientes portadores de úlcera crônica com os obtidos nos pacientes com SMD. ● Comparar os resultados observados nas lâminas de sangue periférico e de medula obtidos nos pacientes com SMD.
um montante de 45 lâminas, sendo 15 de UCMI, 15 de SMD de SP e 15 de SMD de MO. Os materiais foram analisados no microscópio óptico, avaliando a morfologia dos neutrófilos com a contagem do número de lobos. Foram contados 100 neutrófilos, na objetiva de 40x e, em caso de dúvidas, observava-se na de 100x. A classificação do número de lobos foi feita da seguinte maneira: 1, 2, 3, 4 e 5 ou mais, onde a cada observação de cada neutrófilo acrescentava-se ao número correspondente de lobos presentes. Para a organização dos dados obtidos durante o estudo foi utilizado planilhas no Excel com o intuito de facilitar a análise dos resultados posteriormente. As análises estatísticas foram realizadas pelo programa GraphPad Prism 5 versão 5.02. O teste T não pareado foi utilizado para comparar os grupos de SMD e de UCMI e também para comparar os dados obtidos na análise do SP e da MO dos pacientes com SMD. Os valores foram considerados estatisticamente significativos quando p for menor ou igual 0,05.
Após a definição de um critério para a seleção das lâminas foram selecionadas 30 lâminas de pacientes com SMD, sendo 15 de MO e 15 de SP de um projeto com o seguinte tema, ‘’AVALIAÇÃO DO CARIÓTIPO NAS NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS EM PACIENTES DO HOSPITAL UNIVERSITÁRIO ANTÔNIO PEDRO’’. Para esse mesmo estudo também foram selecionadas 15 lâminas de SP de pacientes com UCMI de um outro projeto, ‘’INVESTIGAÇÃO LABORATORIAL DA PRESENÇA DAS PRINCIPAIS ANEMIAS CARENCIAIS E HEMOLÍTICAS HEREDITÁRIAS EM PORTADORES DE ÚLCERAS CRÔNICAS DE MEMBROS INFERIORES’’. Foram incluídos no grupo de SMD 8 pacientes do sexo feminino (53,3%) e 7 do sexo masculino (46, 7 %) e a idade mínima foi de 20 anos e a máxima de 90 anos com uma média de idade de 62, 1 anos (Tabela 1). No grupo de UCMI foram incluídos 1 paciente do sexo feminino (6,7%) e 14 do sexo masculino (93,3%) com a idade mínima de 46 anos e a máxima de 81 anos com uma média de 63, anos (Tabela 1). Tabela 1 - Distribuição dos pacientes com SMD e UCMI de acordo com a idade e o sexo. SMD UCMI N % N % Sexo Feminino 8 53,3 1 6, Masculino 7 46,7 14 93, Idade (anos) 20|--- 32 1 6,7 - 32 |--- 44 2 13,3 - 44 |--- 56 2 13,3 3 20 56 |--- 68 2 13,3 7 46, 68 |--- 80 5 33,4 3 20 80|--- 92 3 20 2 13, Total 15 100 15 100 Média 62,1 63, A partir da análise dos prontuários dos 30 pacientes, 15 com SMD e 15 com UCMI foram descritas informações sobre dados clinicopatológicos e achados laboratoriais dos mesmos. No grupo com UCMI foi descrito o tempo do histórico de
(13,3%) dos 15 pacientes apresentaram contagem absoluta de neutrófilos acima de 7.000/μL, 10 (66,7%) dos 15 pacientes, sendo 1 mulher e 9 homens, apresentaram valores de Hb abaixo de 12 g/dL e 13 g/dL, e 1 (6,6%) dos 15 pacientes apresentou contagem de plaquetas abaixo de 150.000/μL. A partir dos parâmetros mais importantes do hemograma foi descrita uma tabela a seguir. Tabela 4 - Cálculo da mediana dos valores do hemograma SMD UCMI Variáveis Mediana Variação Mediana Variação Hemoglobina Feminino 9,3 6,3 - 13,0 10,1 10, Masculino 8,4 6,0 - 16,4 12,7 8,7 - 15, Contagem Global de Leucócitos 3 1,10-^ 15,20^ 6,6^ 4,20^ -^ 12, Contagem Absoluta de Neutrófilos 1,33^ 0,21^ -^ 10,36^ 3,9^ 2,48^ -^ 8, Plaquetas 149 11 - 1.045 238 47 - 361 A análise morfológica dos neutrófilos foi realizada em todas as lâminas de cada paciente avaliando o número de lobos observados em cada um com o seguinte critério: 1, 2, 3, 4, 5 ou mais e durante o estudo foram realizados alguns registros dos NPPH observados (figura 3 ). Com o intuito de facilitar a análise estatística foi proposto uma nova padronização para a organização dos dados obtidos durante o trabalho. Esse novo padrão foi baseado em dois critérios: um grupo com os NPPH e outro com os neutrófilos não Pseudo-Pelger-Huët (NNPPH). No grupo dos NPPH foram inseridos a contagem com 1 e 2 lobos e no outro grupo 3, 4 e 5 ou mais. Esse novo padrão foi aplicado no grupo com SMD nos dois tipos de amostra e no grupo com UCMI nas amostras de SP. Esse novo critério foi definido com respaldo na literatura que descreve que NPPH podem apresentar núcleo bilobado, redondo ou oval (GUAN; JONAH; SAVAGE, 2019). A partir da nova organização dos dados foi realizada a análise estatística utilizando apenas os valores referentes aos NPPH observados, pois este é o centro do estudo. O primeiro dado obtido foi a comparação das porcentagens de NPPH observadas em SP nos casos de SMD e UCMI, como observado na figura 4. Com isso, avaliando o grupo com UCMI é possível observar que 5 pacientes apresentaram valores acima da média do grupo com SMD e não identificamos
diferença estatística entre os dois grupos (p=0,1350), demonstrando que ambos os grupos possuem quantidades equivalentes de NPPH. Figura 3 - Fotos de Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët observados na medula óssea e no sangue periférico. A e B) Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët observados no sangue periférico de pacientes com úlcera crônica de membros inferiores. C) Neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët observados na medula óssea de pacientes com Síndrome Mielodiaplásica. (Fonte: Própria) Figura 4 - Comparação da porcentagem de neutrófilos Pseudo-Pelger-Huët em sangue periférico de pacientes com SMD e UCMI. Teste t não pareado comparando os valores de neutrófilos observados nos dois grupos. (n=30) (p=0,1350) A análise dos valores obtidos nas amostras de SP e de MO dos pacientes com SMD foi realizada e, a partir dos resultados, comparamos os diferentes tipos de amostra (figura 5 ). Observamos que uma quantidade considerável de pacientes apresentava porcentagem de NPPH maiores dos que observados no SP (p=0,019).
