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TECNOLOGIA DO DNA RECOMBINANTE APLICADA AO
DESENVOLVIMENTO DE VACINAS PARA DOENÇA DE CHAGAS
THE RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY APPLIED TO THE DEVELOPMENT OF
VACCINES FOR DISEASE CHAGAS
Alisson Silva Fonseca Luciene Sampaio Paulo Sérgio do Valle Talita Melo Tavares
RESUMO
A doença de Chagas, também conhecida como tripanossomíase americana, é uma importante doença parasitária crônica causada pelo protozoário flagelado Trypanossoma cruzi , tendo sido descoberta e descrita por Carlos Chagas em 1909. As vacinas de antígenos recombinantes proporcionam uma nova alternativa para a prevenção e tratamento de uma variedade de doenças infecciosas, incluindo a doença de Chagas. A técnica tem permitido a produção de vacinas usando proteínas com propriedades capazes de induzir uma resposta humoral e celular específica à resposta imunitária.
Palavras Chave: Trypanossoma cruzi , recombinação, tecnologia, DNA, vacina
ABSTRACT
Chagas disease, also called American trypanosomiasis, is a major chronic disease caused by parasitic flagellate protozoan Trypanosoma cruzi have been discovered and described by Carlos Chagas in 1909. Recombinants vaccine antigens provide a new alternative for the prevention and treatment of a variety of infectious diseases, including Chagas disease. The technique has allowed production of vaccines using proteins with properties capable of inducing a specific humoral and cellular immune response.
Keywords : Trypanossoma cruzi , recombination technology, DNA, vaccine
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1 INTRODUÇÃO
A doença de Chagas, também conhecida como tripanossomíase americana, é uma importante doença parasitária crônica causada pelo protozoário flagelado Trypanossoma cruzi , tendo sido descoberta e descrita por Carlos Chagas em 1909 (CHAGAS, 1909).
A tecnologia do DNA recombinante é uma técnica que tem como princípio teórico e prático o dogma central da biologia molecular. Com o uso de ferramentas moleculares como: enzimas de restrição e enzimas catalíticas de ligação (DNA ligases) essa técnica tornou-se possível.
Com o advento desta técnica, vários genes que codificam proteínas capazes de promover uma resposta imunológica contra T. cruzi têm sido clonados. Os segmentos dos genes clonados têm sido utilizados com o objetivo de produzir porções dessas proteínas antigênicas. (LORENA, 2008).
A aplicação desta técnica no que diz respeito a infecções parasitárias fornece uma nova esperança para avanços significativos na pesquisa vacinal antiparasitária. É importante colocarmos em pauta a complexidade das doenças parasitárias visto que, ao contrário das infecções virais e bacterianas, as parasitárias tendem a ser crônicas e associadas à imunodepressão ou respostas imunes inadequadas.
Os parasitas têm ciclos de vida complexos e a imunidade do hospedeiro aos antígenos dos diferentes estágios não podem sobrepor-se com a de estágio da infecção. Outros mecanismos imunes de evasão complicam também o desenvolvimento das vacinas contra parasitas. Porém, com a tecnologia de DNA recombinante e a versatilidade da vacina de DNA, é possível agora pensar em estratégias específicas para produção de vacinas contra doenças causadas por parasitas como no caso de doenças causadas pelo Trypanossoma cruzi.
MÉTODOS
A vacina é baseada na tecnologia do DNA (também conhecidas como vacinas de terceira
geração) que envolve a transferência de um determinado gene, que codifica uma proteína
capaz de induzir resposta imunológica dentro de um vetor de expressão para células
eucarióticas. Os vetores virais e plasmidiais são os mais utilizados na transferência gênica
direta. Inicialmente é necessário localizar o gene de interesse, nesse caso os genes que
codificam o CRA ( cytoplasmic repetitive antigen ) ou FRA ( flagellar repetitive antigen )
presentes no genoma do Trypanossoma cruzi que serão seletivamente amplificados por PCR. Posteriormente são adicionadas enzimas de restrição que irão se ligar e clivar em regiões específicas previamente identificadas.
Diferentes nucleases de restrição tem especificidades diferentes, sendo relativamente simples encontrar uma enzima que possa criar um fragmento que inclua um gene em particular podendo, este fragmento, ser clivado. Para a inserção do fragmento desejado é necessário abrir o plasmídeo (molécula de DNA circular, dupla fita e extra cromossomal) do organismo escolhido,
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REFERÊNCIAS
ARCE-FONSECA, M. et al. Prophylactic and therapeutic DNA vaccines against Chagas disease. Parasit Vectors, v. 8, n. 1, p. 121, 2015 2015. ISSN 1756-3305. Disponível em: < http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25885641 >. Acesso em: 18 de abril de 2015.
BERG, P.; MERTZ, J. E. Personal reflections on the origins and emergence of recombinant DNA technology. Genetics, v. 184, n. 1, p. 9 - 17, Jan 2010. ISSN 1943 - 2631. Disponível em: < http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20061565 >. Acesso em: 18 de abril de 2015.
CHAGAS, C. Nova tripanozomiaze humana. Memorias do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, V. 1, n. 2, p. 159-2018, 1909.
GLENTING, J., WESSELS, S. Ensuring safety of DNA vaccines. Microbial Cell
Factories, Barcelona, v.4, n.26, p.1-5, 2005.
GURUNATHAN, S.; KLINMAN, D. M.; SEDER, R. A. DNA vaccines: immunology,
applications, and optimization. Annual Review of Immunology, California, v.18, p.927-
KRIEGER, M. A. et al. Use of recombinant antigens for the accurate immunodiagnosis of Chagas' disease. Am J Trop Med Hyg, v. 46, n. 4, p. 427-34, Apr 1992. ISSN 0002-9637. Disponível em: < http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1575289 >. Acesso em: 18 de abril de 2015.
LORENA, V. M. et al. Cellular immune response from Chagasic patients to CRA or FRA recombinant antigens of Trypanosoma cruzi. J Clin Lab Anal, v. 22, n. 2, p. 91-8, 2008. ISSN 0887 - 8013. Disponível em: < http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18348314 >. Acesso em: 18 de abril de 2015.
