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EXTRAÇÃO DE DNA
Tipologia: Provas
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Não perca as partes importantes!
TURNO.: TARDE/NOITE CARGA HORÁRIA.: 45 hs CURSO DE EDUCAÇÃO FÍSICA PROFESSORA: MSc. ADRIANA SARAIVA DOS REIS
oferecida no bloco I pelo curso de Bacharelado em Educação Física – Faculdade Aliança
TERESINA/PIAUÍ 2012
Durante a evolução da célula formou-se uma molécula, que hoje sabemos ser o ácido desoxirribonucléico (DNA ou ADN): molécula longa, constituída por uma seqüência de nucleotídeos, que por sua vez é formado por três diferentes tipos de moléculas: um açúcar (pentose), um grupo fosfato, e uma base nitrogenada ( Fig.1 ). Essa importante molécula contém as informações básicas para a formação de um ser vivo e para sua reprodução.
Como já disse, o DNA é formado por nucleotídeos,existem quatro tipos de nucleotídeos, representados pelas letras A, C, G e T ( Fig.2 ). As formas como esses nucleotídeos se arrumam é que faz com que os seres vivos sejam diferentes um dos outros. E por isso, as mínimas mutações ocorridas em apenas um nucleotídeo de sua fita, pode alterar a produção de uma proteína importante e causar doenças genéticas, que podem comprometer o ser vivo.
Assim, os quatro tipos de nucleotídeos se arrumam de diversas maneiras na molécula de DNA, formando os diferentes seres vivos.
Uma molécula de DNA é formada por duas fitas de nucleotídeos, que ligados pelas pontes de hidrogênio, forma o que é chamado de dupla hélice ( Fig 3 ). O modelo da dupla-hélice de Watson e Crick foi prontamente aceito pela comunidade científica; ele explicava pelo menos três características fundamentais do material genético: a capacidade de duplicação, a capacidade de conter informações para a produção de proteínas e a capacidade de sofrer mutação. Nessa fita, as bases nitrogenadas seguem o seguinte padrão de combinação: A (adenina) sempre se liga com T (timina), e C(citosina) com G (guanina). A simples combinação dessas letras é o que forma os seres vivos ( Fig 4 ).
Pouco mais de 50 anos se passaram desde a descoberta da estrutura de DNA, e hoje assistimos a um espantoso avanço nesta área de pesquisa. As discussões sobre o DNA estão em toda parte: clonagem, Projeto Genoma, alimentos transgênicos, testes de paternidades; são várias as aplicações desse novo conhecimento, que também levanta questões éticas fundamentais que os cientistas tentam responder.
A extração das moléculas de DNA de células do bulbo da cebola. Aplicando os conhecimentos adquiridos em aula sobre o DNA, esse experimento serve como complemento para as atividades realizadas em classe e para enriquecimento da aprendizagem.
Os esquemas abaixo são relativo a extração de DNA da cebola,realizado em laboratório.
Fig. 1 – Resultado da extração de DNA
Fig. 2 – Cadeia de DNA
1°. Qual a função de cada regente usado na extração simplificada do DNA explanada nesta aula prática?
R= A adição do sal ( NaCl ) no início da experiência proporciona ao DNA um ambiente favorável. O sal contribui com íons positivos e negativos. Os positivos neutralizam a carga negativa do DNA, e os negativos as histonas, permitindo que o complexo DNA+Histonas não se repila mais e então se enovele. Se não fosse a presença do sal, ele poderia desintegra-se. Um outro fato, é que o sal aumenta a densidade do meio, o que facilita a migração do DNA para o álcool. O detergente afeta a permeabilidade das membranas, que são constituídas, em parte, por lipídeos. Com a ruptura das membranas os conteúdos celulares, incluindo as proteínas e o DNA, são liberados e dispersam-se na solução. A função de algumas dessas proteínas é manter o DNA enrolado numa espiral muito apertada. O álcool etílico permite uma maior desidratação das moléculas.
2°. O que se consegue ver seria o DNA puro?
R= É possível a observação do DNA (emaranhado), que se apresenta por filamentos esbranquiçados; porém a observação das hélices só é possível através do uso de aparelhos sofisticados.
3°. Como se sabe que os filamentos são moléculas de DNA?
R= Porque, a partir de estudos das propriedades químicas dos filamentos sabe- se que estes têm as mesmas propriedades das moléculas de DNA. Por exemplo, o RNA não se enrolaria no palito, o DNA não é solúvel em álcool, é menos denso que a água, tem grande absorção de luz UV, quando corado com brometo de etídio mostra-se fluorescente em luz UV.
Disponível na URL:
http://www.universitario.com.br/celo/topicos/subtopicos/genetica/dna/dna.html
Acesso às 19:30 do dia 11/04/
Disponível na URL:
http://pt.scribd.com/doc/30280669/Relatorio-de-Extracao-de-DNA
Acesso às 19:56 do dia 11/04/
Disponível na URL:
http://www.notapositiva.com/pt/trbestbs/biologia/11extrdnacelveg.htm
Acesso às 20:04 do dia 11/04/
Disponível na URL:
http://www.biomol.org/historia/propduplahelice.shtml
Acesso às 20:17 do dia 11/04/
Disponível na URL:
JUNQUEIRA, L. C.; CARNEIRO J. Biologia Celular e Molecular. Rio de Janeiro: 8ª ed. Guanabara. 2005.
Acesso às 10:43 do dia 12/04/
Disponível na URL:
MENCK, Carlos Frederico Martins.Estudo de reparo de DNA e suas conseqüências biológicas. Projetos de pesquisa temáticos. Disponível em:
http://www.bv.fapesp.br/projetos-tematicos/1865/estudos-reparo-dna-consequencias- biologicas/
Acesso às 11:05 do dia 12/04/
Fig. 1 - Nucleotídeo de DNA
Fig. 2 - Fita de DNA, com atenção as bases nitrogenadas
Fig. 3 - Dupla-hélice do DNA
Fig. 4 - Fitas de DNA ligadas nas bases nitrogenadas