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Pratica sobre a técnica de TSA - Experimento
Tipologia: Manuais, Projetos, Pesquisas
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Prof.ª ELAINE AMORIM SOARES
Verificar a sensibilidade ou resistência das bactérias aos antibióticos determinados.
O Antibiograma ou Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos é uma prova utilizada para alguns grupos de bactérias, principalmente as que adquirem resistência. Os testes para detecção de resistência são realizados em bactérias isoladas de amostras representativas de um processo infeccioso, no qual a sensibilidade a antibióticos. Não é previsível ou quando existem problemas de resistência a antibióticos. A metodologia mais difundida é o método de Kirby e Bauer, por sua praticidade de realização, baixo custo e confiabilidade nos resultados obtidos. Sua praticidade de execução, esta técnica tem a necessidade de ser efetuada corretamente, para que seja feita a comparação com as tabelas padronizadas. São utilizados discos contendo os antibióticos, que posteriormente serão introduzidos em uma placa de petri contendo o ágar Mueller-Hinton e o inoculado com os microorganismos estudados. O meio Mueller-Hinton é utilizado por possuir propriedades que permitem o crescimento da maioria dos microorganismos não permitindo que seu perfil nutricional interferir na sensibilidade ou resistência das bactérias aos antibióticos. Para a realização do TSA, é armazenado em uma estufa bactericida, para observação do surgimento ou não dos halos entorno dos discos. Para a aferição é utilizado uma régua ou paquímetro permitindo a medição dos halos para a comparação com a tabela utilizada.
Com o auxílio da tabela 1 pode ser feita a classificação dos halos obtidos, assim determinara a sensibilidade do Staphylococcus Aureus referente aos antibióticos estudados.
Azitromicina AZI 15 13 ou - 14 – 17 18 ou + Penicilina PEN 10 28 ou - 28 – 29 29 ou + Gentamicina GEN 10 12 ou - 13 – 14 15 ou + Ampicilina AMP 10 13 ou - 28 0u -
17 ou + 29 ou + Estreptomicina EST 10 11 ou - 12 – 14 15 ou + Polimixina POL 300 8 ou - 9 – 11 12 ou +
Tabela 1 – Limites para a interpretação da sensibilidade das bactérias aos discos de antibióticos (em mm) – TSA.
Imagem 1 – Demonstração sobre o experimento aplicado.
Com a medição dos halos foram obtidas as seguintes medidas demonstradas na tabela a seguir.
Antibiótico Tamanho do halo (mm) Sensibilidade Azitromicina (AZI 15) 20 Sensível Penicilina (PEN 10) 12 Resistente Gentamicina (GEN 10) 15 Sensível Ampicilina (AMP 10) 12 Resistente Estreptomicina (EST 10) 12 Resistente Polimixina (POL 300) Sem formação Resistente
Tabela 2: Classificação da sensibilidade do Staphylococcus aureus para os antibióticos.