Prática 3: Semeadura, isolamento e identificação de
microrganismos (diferenciação)
• Introdução:
As necessidades nutritivas das bactérias são variáveis. Entre as cultiváveis, em um extremo estão as que só se
proliferam em substâncias orgânicas, e no outro, as que se proliferam em substratos inteiramente inorgânicos. Todas
as bactérias de importância médica pertencem ao primeiro grupo.
Para que as bactérias possam crescer e se multiplicar nos meios de cultura é necessário que disponham de uma
fonte de C e de N; só assim podem efetuar a síntese de sua própria matéria orgânica. Além das duas fontes
mencionadas incorpora-se ao meio de cultura, os chamados fatores de crescimento, representados por certos
aminoácidos (triptofano, cistina, etc) e certas vitaminas (complexo B). Estas e outras substâncias que compõem o meio
de cultura são o alimento bacteriano, os chamados nutrientes ou substâncias extracelulares que penetram na célula
através de sua membrana e são usadas pelos microrganismos para a obtenção de energia e construção de seu
“esqueleto”.
Chama-se meio de cultura a um substrato ou uma solução nutriente nos quais os microrganismos são
cultiváveis em laboratório. E dá-se o nome de cultura a qualquer crescimento ou cultivo de microrganismo.
Para cultivo das bactérias de importância médica, usamos meio de cultura complexo, contendo substâncias
orgânicas facilmente utilizáveis e, evidentemente, água e íons. Dependendo das exigências dos microrganismos,
podem ser adicionados, ou não, sangue e compostos ricos em vitaminas. O ágar, usado nos meios de cultura, não tem
valor nutricional. Para o cultivo de qualquer microrganismo deve-se levar em conta a temperatura, o pH e as
necessidades respiratórias.
Os meios de cultura usados podem ser de três tipos: sólidos (ágar comum, ágar sangue, ágar MacConkey, ágar
SS); líquidos (caldo de nutriente, caldo glicosado, caldo TSB, etc) e semi sólidos (Meio de Tioglicolato). Os meios
utilizados para pesquisar microrganismos também podem ser seletivos e/ou diferenciais.
Meios seletivos - permitem o crescimento de apenas um ou alguns grupos de bactérias (Exemplos: Ágar
MacConkey, TCBS, Ágar Baird Parker etc).
Meios diferenciais - permitem, através da visualização macroscópica, a diferenciação de grupos de
microrganismos com características fisiológicas diferentes.
Meios sintéticos ou quimicamente definidos - sua composição química é conhecida quantitativamente.
Meios complexos - sua composição química é conhecida qualitativamente.
• Material da prática (nas bancadas)
a. Culturas de bactérias (em eppendorfs):
(A) - Escherichia coli (G-)
(B) – Salmonella spp. (G-)
(C) – Staphylococcus aureus (G+)
b. Alça microbiológica
