Fundamentos da Espectrofotometria: Absorção de Radiação Eletromagnética, Slides de Energia

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ESPECTROFOTOMETRIA

UV-VISÍVEL

Departamento de Engenharia Química – DEQUI ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA – EEL/USP

“Uma maneira boa de cutucar moléculas, é com

radiação eletromagnética (luz)”

A espectrofotometria faz parte da classe dos métodos

analíticos que baseiam-se na interação da matéria

com a energia radiante

Fundamentos da Espectrofotometria Luz incidente Luz emergente Luz absorvida Perdas:

**- reflexões

• dispersão** - absorção
• Boa sensibilidade
• Baixo custo de análise
• Fácil operação
• Equipamentos robustos

 Absorção de Luz

Fundamentos da Espectrofotometria

Espectro Eletromagnético

 Porque ocorre o fenômeno da absorção?

 Moléculas que apresentam elétrons que podem ser

promovidos a níveis de energia mais elevados mediante a

absorção de energia

 TRANSIÇÕES ELETRÔNICAS

 Níveis discretos de energia são absorvidos devido à

vibrações e rotações das moléculas

 ROTACIONAL E VIBRACIONAL

 Por este motivo não se observa uma linha de absorção

nítida, mas sim uma banda de absorção

 ESPECTRO UV-VISÍVEL Fundamentos da Espectrofotometria

Transições Eletrônicas

Espectro UV-Visível

 Dois requisitos devem ser observados para que uma

determinada radiação possa ser absorvida por uma

molécula:

 1 - A radiação incidente deve ser de freqüência

equivalente aquela rotacional ou vibracional, eletrônica ou

nuclear da molécula,

 2 - A molécula deve ter um dipolo permanente ou um

dipolo induzido, ou seja, deve haver algum trabalho que a

energia absorvida possa fazer.

Fundamentos da Espectrofotometria

Espectros de absorção de diferentes substâncias Espectros de absorção diferentes substâncias (1: bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3: clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: beta-caroteno)

Lei de Beer-Lambert

A espectroscopia de absorção molecular está baseada na medida de absorbância (A) ou transmitância (T), que estão relacionadas através das equações:

 LIMITAÇÃO REAL

 A Lei é válida somente para baixas concentrações  Altas concentrações = Interação entre as moléculas afeta a distribuição de carga, alterando o coeficiente de absortividade molar

 DESVIO QUÍMICO

 Surgem quando um analito se dissocia, se associa ou reage com um solvente para dar um produto que tem um espectro de absorção diferente

Desvios da Lei de Beer-Lambert

 DESVIO INSTRUMENTAL

 A lei só é válida para radiação monocromática, ou seja, para um único comprimento de onda (  ) Como minimizar o desvio?  Escolher a região onde o  é constante na região selecionada

Desvios da Lei de Beer