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visualização microscópica de bactérias gram-positivas e gram-negativa.
Tipologia: Esquemas
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PROFESSOR Marcos Pedroza RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EM LABORATÓRIO OBSERVAÇÃO DA COLORAÇÃO DE BACTERIAS GRAM Elen Cristina Kruguel Tavares Ji-Paraná, 05 de março de 2020
1. Introdução: Coloração de Gram é uma técnica de coloração para diferenciação de microrganismos através das cores, para serem observados em microscópio óptico. A técnica recebeu este nome em homenagem ao patologista dinamarquês Hans Christian Joachim Gram, por volta de 1884, Hans Gram observou que as bactérias, após serem tratadas com diferentes corantes, adquiriram cores diferenciadas. A técnica de Gram é fundamental para a taxonomia e identificação das bactérias, sendo muito utilizada atualmente, como técnica de rotina em laboratórios de análises clínicas e microbiologia. 2. Objetivo: Observar e diferenciar bactérias Gram positivas e Gram negativas através do método de coloração Gram. 3. Material e Métodos: i. Alça de platina ii. Lâmina de vidro iii. Água destilada iv. Cristal violeta v. Álcool absoluto vi. Lugol vii. Fucsina fenicada viii. Papel toalha Com uma amostra de cada cultura, foi feito um esfregaço no centro de uma lâmina de vidro com auxílio da alça de platina. Depois a lâmina foi passada pela face oposta ao esfregaço sobre o fogo para melhor fixação, pois esse processo retira toda a agua da bactéria. Foi gotejada a solução de cristal violeta de maneira a cobrir todo o esfregaço e deixou-se corar por um minuto; o reagente violeta penetrará a parede de ambas bactérias. Após, lavou-se a lamina com água destilada para retirar todo excesso do cristal. Depois foi gotejada sobre os esfregaços a solução de lugol e, que penetrará a membrana celular e citoplasma que acontecerá a fixação do cristal, deixado reagir durante um minuto. Com a lâmina inclinada, foi aplicado álcool absoluto de forma a lavar o resíduo de corante. Depois a lâmina foi lavada com água destilada para retirar excesso dos reagentes. Em seguida, foi gotejada a fucsina fenicada para percebermos o contraste entre as bactérias Gram positivas e Gram negativas. Após um minuto, a solução foi lavada com agua destilada. Com auxílio do papel toalha, retirou-se o excesso da água. As bactérias que tiverem a característica irão formar cristais violeta em seu interior e se diferenciarão das demais pela coloração mais acentuada. Depois de seca, a lâmina foi levada e posicionada ao microscópio e, de início ajustada com a objetiva de 10x e posteriormente com a objetiva 100x. 4. Resultados:
