Estude fácil! Tem muito documento disponível na Docsity
Ganhe pontos ajudando outros esrudantes ou compre um plano Premium
Prepare-se para as provas
Estude fácil! Tem muito documento disponível na Docsity
Prepare-se para as provas com trabalhos de outros alunos como você, aqui na Docsity
Os melhores documentos à venda: Trabalhos de alunos formados
Prepare-se com as videoaulas e exercícios resolvidos criados a partir da grade da sua Universidade
Responda perguntas de provas passadas e avalie sua preparação.
Ganhe pontos para baixar
Ganhe pontos ajudando outros esrudantes ou compre um plano Premium
Comunidade
Peça ajuda à comunidade e tire suas dúvidas relacionadas ao estudo
Descubra as melhores universidades em seu país de acordo com os usuários da Docsity
Guias grátis
Baixe gratuitamente nossos guias de estudo, métodos para diminuir a ansiedade, dicas de TCC preparadas pelos professores da Docsity
A cinética enzimática, explorando a determinação da taxa de reação e a análise de parâmetros cinéticos como vmáx e ks. Através de exemplos práticos, o documento demonstra como calcular a atividade específica de uma enzima e como determinar a quantidade de produto formado em um determinado tempo. Além disso, o documento apresenta a equação de michaelis-menten e sua aplicação na análise de dados cinéticos.
Tipologia: Slides
1 / 33
Esta página não é visível na pré-visualização
Não perca as partes importantes!
1 /
Quantificação da atividade enzimática 2
UNIDADE DE ATIVIDADE ENZIMÁTICA
Exemplo: Calcular a ATIVIDADE ESPECÍFICA (U/mg proteína) de glucoamilase em um preparado bruto. Adicionou-se 1 mL do preparado bruto, que continha 8 mg de proteína (total), em 9 mL de solução de amido a 4,44%. Os experimentos revelaram que a taxa inicial da reação produziu 0,6 μmol de glicose/mL.min. Neste caso específico: 1 U glucoamilase é definida como a quantidade de enzima que produz 1 μmol de glicose por minuto em uma solução aquosa de amido a 4% em pH 4,5 e 60oC. Cuidado … varia de acordo com cada tipo de enzima!!! 4
própria taxa (ou velocidade) da reação. Veja as unidades! mol/L.s → taxa volumétrica de reação! P (mol/L) Tempo (s) Taxa inicial da reação r 0 = 0,6 μmol de glicose/mL.min Amido (^) Glicose glucoamilase Reação : Preparado bruto 1 mL 8 mg prot. (total) 9 mL sol. amido 4,44% Experimento: 1 U glucoamilase: quantidade de enzima que produz 1 μmol de glicose por minuto (em uma solução 4% de Amido a pH 4,5 e 60 o C). Ajustar para a definição de U r 0 = 0,6 μmol de glicose/mL.min Base de cálculo: 1 mL Atividade específica: Em 10 mL Vtotal= 10 mL 5 Portanto:
7 / Reações elementares: são reações na qual a velocidade da reação corresponde à estequiometria da reação. Neste caso, a hipótese é que o número de colisões das moléculas é proporcional à velocidade da reação. Para uma reação do tipo: A velocidade (ou taxa) de consumo de A será dada pela expressão: Reações não-elementares: não há uma relação direta entre a estequiometria e a velocidade da reação.
8 / Reações reversíveis: a conversão de reagentes em produtos ocorre simultaneamente com a reversão de produtos em reagentes.
A B Temperatura constante
Concentração (mols/m 3
Tempo (horas) Região cinética Região de equilíbrio B A
Reação reversível – Formação do complexo ES E + S
k: constante da taxa (ou velocidade específica) da reação ou constante da taxa de reação
r
= 0 Duas importantes relações podem ser estabelecidas: Constante de equilíbrio (baseada na concentração) Constante de dissociação Importante para a proposição de modelos matemáticos em cinética e reatores químicos! EQ Importante para a proposição de modelos matemáticos em enzimologia e sistemas biológicos! EQ
CINÉTICA ENZIMÁTICA
1902 → V.C.R. Henri
11 journal Biochemische Zeitschrift
[S]0,n
(mol/L) Tempo (s) Em cada experimento: determinar a taxa inicial de reação 13
Fonte: https://www.pathwayz.org/Tree/Plain/ENZYMES+%26+SUBSTRATE+CONCENTRATION (^) 14
Cinética Enzimática: Sistema com um Único Substrato
k 1 k
- 1
Modelo cinético: Balanço de massa para a enzima:
16 É possível medir a concentração de enzima livre? E do complexo ES?
Cinética Enzimática Equilíbrio rápido 17
Perfil da Velocidade da Reação Reação em condições constantes de:
Hipótese do Equilíbrio Rápido Validade da Equação de Henri-Michaelis-Menten:
[S] V 20
