UNIDAD II: Bases Moleculares de
la Biotecnología y Técnicas
de ADN Recombinante
Docente Germania Tirado
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Técnicas de ADN Recombinante: Bases Moleculares de la Biotecnología - Prof. Coral, Diapositivas de Genética Médica
Una introducción a las técnicas de adn recombinante, explorando conceptos clave como vectores, selección antibiótica y genómica. Se analizan diferentes tipos de vectores, incluyendo vectores bacteriófagos, cósmidos, vectores de expresión, bacs y yacs. También se describe el proceso de clonación de genes, incluyendo la creación de bibliotecas de dna y el rastreo de bibliotecas. Se explora la importancia de la reacción en cadena de la polimerasa (pcr) y la secuenciación de dna. Finalmente, se introduce la genómica y la bioinformática, destacando su papel en la biotecnología moderna.
Tipo: Diapositivas
2024/2025
1 / 25
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UNIDAD II : Bases Moleculares de
la Biotecnología y Técnicas
de ADN Recombinante
Docente Germania Tirado
Tema: 2 Técnicas de ADN Recombinante
1. - Vectores o plásmidos de DNA
2. - Selección antibiótica
3. - Genómica – Proteómica
Los vectores cósmidos contienen extremos COS de DNA λ, un origen plasmídico de replicación y genes de resistencia antibiótica, pero la mayoría de los genes virales se han
Vectores cósmidos
Los vectores de expresión de proteínas permiten la síntesis de alto nivel (expresión) de las proteínas eucariotas dentro de las células bacterianas porque contienen una secuencia promotora procariota adyacente al sitio en el que se inserta el DNA en el plásmido. eliminado. Una de las principales ventajas de los cósmidos es que permiten la clonación de fragmentos de DNA en el rango de los 20 a los 45 kb.
Vectores de expresión
Los cromosomas artificiales bacterianos (BAC) son grandes plásmidos de bajo número de copias, presentes como de una a dos copias en células bacterianas que contienen genes que codifican el factor F (un conjunto de genes que controla la replicación bacteriana).
Cromosomas
artificiales
bacterianos
Son pequeños plásmidos que han crecido en E. coli y han sido introducidos en células de levadura (como Saccharomyces cerevisiae ).
Los cromosomas
artificiales de
levaduras (YAC)
Vectores Ti
Los vectores Ti son plásmidos que se originan naturalmente (de alrededor de 200 kb de tamaño) aislados de la bacteria Agrobacterium tumefaciens , un patógeno vegetal que vive en el suelo y que causa una enfermedad en las plantas llamada tumor del cuello o agalla.
¿Cómo identificar y clonar un gen de interés?
Crear bibliotecas de DNA:
construir una colección de
genes clonados
La clonación shotgun (o aleatoria) es muy utilizada porque se puede clonar a la vez muchos fragmentos aleatoriamente y no hay genes destinados para la individuales específicamente clonación.
Las bibliotecas de
DNA
genómico
Las bibliotecas de DNA
complementario
(bibliotecas de cDNA).
Rastreo de la biblioteca
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
¿ Qué se hace con un gen clonado
Electroforesis en gel y mapeo de la estructura genética con enzimas de restricción
Secuenciación de DNA
Transferencia Southern
Microarray de genes
Genómica y bioinformática:
nuevas áreas de
biotecnología
de plena actualidad
Bioinformática: fusión de la biología molecular con la tecnología informática ● (^) La manipulación de las bases de datos de las secuencias de DNA fue una de las primeras aplicaciones de la bioinformática ● (^) Como los datos sobre el genoma se han ido acumulando rápidamente, resultando en una cantidad enorme de información
Ejemplos de bioinformática en acción
- (^) Las bases de datos son herramientas fundamentales para archivar y compartir datos con otros investigadores y con el público.
- (^) Entre otras aplicaciones, estas bases de datos también pueden utilizarse para predecir la secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de nucleótidos y para suministrar información sobre el funcionamiento del gen clonado.
Búsqueda de bases de datos de
DNA:
- (^) Se puede utilizar un programa del NCBI Herramienta de Búsqueda de Alineación Local Básica Un esfuerzo de clonación de genomas de proporciones épicas: el Proyecto del Genoma Humano
- (^) Analizar variaciones genéticas entre seres humanos. Esto incluía la identificación de polimorfismos de nucleótidos simples
- (^) Cartografiar y secuenciar los genomas de organismos modelo, incluyendo bacterias, levaduras, gusanos, moscas de la fruta y ratones.