EL NORTHERN BLOT
es una técnica de biología molecular utilizada para detectar y analizar la presencia y la
cantidad de ARN específico en una muestra de tejido o células. Aunque ha sido
superado en popularidad por métodos más modernos como la reacción en cadena de
la polimerasa (PCR) y la secuenciación de ARN de próxima generación (NGS), el
Northern blot sigue siendo una herramienta valiosa en la investigación científica,
especialmente en estudios de expresión génica.
Se utiliza comúnmente en investigaciones relacionadas con la expresión génica para
estudiar la transcripción y la abundancia relativa de ARN mensajero (ARNm) específico
en diferentes condiciones experimentales, como en respuesta a estímulos
ambientales o tratamientos farmacológicos. Aunque es una técnica robusta y
ampliamente utilizada, tiene limitaciones, como su sensibilidad limitada para detectar
ARN de baja abundancia y la necesidad de grandes cantidades de ARN para obtener
resultados significativos. Sin embargo, sigue siendo una herramienta valiosa en el
arsenal del investigador molecular.
El proceso del Northern blot sigue varios pasos:
• Extracción de ARN: El primer paso es extraer el ARN total de la muestra
biológica de interés. Esto se logra generalmente mediante el uso de reactivos
de lisis celular para romper las membranas celulares y liberar el ARN.
• Electroforesis en gel de agarosa: El ARN total extraído se somete a
electroforesis en gel de agarosa. Durante este proceso, las moléculas de ARN
se separan según su tamaño en un gel de agarosa en un campo eléctrico.
• Transferencia a una membrana: Después de la electroforesis, el ARN
separado en el gel se transfiere a una membrana de nitrocelulosa o nylon
mediante un proceso de transferencia llamado "blotting". Esto implica colocar
la membrana sobre el gel y aplicar una corriente eléctrica, lo que hace que el
