Guía operativa:
EXTRACCIÓN DE ADN A PARTIR DE MUESTRAS DE SANGRE
Programa de Mejoramiento Genético Animal
Guía de Laboratorios de Biología Molecular
PRACTICA EXTRACCIÓN DE ADN
Docente: Lizeth Mejía Ortiz, MSc,
INTRODUCCION
La extracción de ADN es un procedimiento rutinario que se usa para aislar el ADN desde el
núcleo de las células. Los pasos que se siguen para obtener el ADN son:
1. Romper las células para liberar el ADN (Lisis celular)
Las células de una muestra se separan unas de otras, a menudo por medios físicos, como
maceración o agitación y la muestra se coloca en una solución que contiene sal.
Luego se agrega un detergente; el detergente descompone los lípidos en la membrana
celular y nuclear. Cuando las membranas que recubren las células se rompen el ADN se
libera.
2. Separación del ADN de las proteínas y otros componentes celulares
Para obtener una muestra de ADN limpia, es necesario remover tantos componentes celulares
como sea posible. Este procedimiento puede realizarse por una variedad de métodos. A
menudo se utiliza una enzima llamada proteasa que se adiciona para degradar las proteínas
asociadas con el ADN y otras proteínas celulares, adicionalmente otros componentes
celulares se pueden remover filtrando la muestra.
3. Precipitación del ADN con un alcohol
Un alcohol frio (ya sea etanol o isopropanol) se adiciona cuidadosamente a la muestra de
ADN para separarlo, teniendo en cuenta que el ADN es soluble en agua pero insoluble en la
presencia de sal y alcohol.
En el laboratorio, la extracción de ADN se realizó en un protocolo con el uso de un kit
comercial, que utiliza una columna que contiene una resina de silica que selectivamente
atrapa el ADN para su separación.
4. Purificación del ADN
Luego, la muestra de ADN se purifica o se limpia. Con una serie de pasos de lavado que
limpian todas aquellas impurezas que hayan quedado en la columna que tiene atrapado el
ADN.
5. Elución del ADN
