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GUÍA DE LABORATORIO BIOQUÍMICA II
Versión: 4.
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PRÁCTICA Nº 1
INTRODUCCIÓN A BIOMOLÉCULAS
SEMINARIO BIOSEGURIDAD
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO. –
El laboratorio de Bioquímica es el complemento a la materia teórica de Bioquímica I,
estableciendo una correlación con los temas impartidos en la teoría.
El laboratorio de análisis bioquímico es un ambiente dinámico actual que permite
enfrentar el reto de manejar pruebas más sensibles, específicas y efectivas en el
monitoreo de la salud y la enfermedad basados en conocimientos previos de la parte
teórica de Bioquímica sobre los constituyentes químicos de los seres vivos, sus
funciones y transformaciones que pueden alterarse y desencadenar en procesos
patológicos.
Las prácticas están diseñadas para que los estudiantes desarrollen un conjunto de
habilidades que les permitan la aplicación flexible de las técnicas manuales mediante la
utilización de equipos y materiales específicos de laboratorio, cumpliendo estrictamente
con las normas de bioseguridad y de manejo de residuos biológicos establecidas en el
laboratorio.
En adición, el estudiante debe familiarizarse con las distintas unidades de medición y
factores de conversión utilizados en Bioquímica que le permitan calcular resultados,
interpretar valores y resolver casos clínicos.
Por otro lado, durante el curso se debe fomentar que el estudiante por sí mismo, consulte
y complemente las clases prácticas, mediante la revisión de la bibliografía de referencia
que le impulse a la actualización continua de sus conocimientos.
Material volumétrico
Son aquellos que se utilizan para medir volúmenes, son de vidrio o de plástico
transparente que permiten la visualización del líquido que se desea medir, poseen unas
marcas grabadas ya sea en forma graduada o de aforos.
MATRAZ VOLUMÉTRICO O AFORADO
Es un recipiente con forma de pera, fondo plano y un cuello largo y delgado, puede
ser de vidrio borosilicato o polipropileno, dependiendo de su aplicación Tiene una
marca grabada alrededor del cuello que indica un volumen determinado que contiene
a una temperatura específica. La marca de graduación rodea todo el cuello de vidrio,
por lo cual es fácil determinar con precisión cuándo el líquido llega hasta la marca.
Los matraces se presentan en volúmenes que van de 10 ml hasta 2 l.
Uso : Se emplea para la preparación de disoluciones de concentración conocida y
exacta.
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MATRAZ ERLENMEYER
Es un frasco cónico de vidrio de base ancha y cuello estrecho, que puede ser de
diversas capacidades.
Usos: Se emplea para el calentamiento de sustancias, agitación de sustancias y
preparación de reactivos de trabajo.
PIPETA MANUAL
El volumen de la pipeta se determina por diversas graduaciones de enrace y existe
desde 0,1 ml a 10 ml. Puede ser de vidrio (reutilizables), o de plástico (de un sólo uso).
La pipeta se llena por un sistema mecánico denominado propipeta que es un
instrumento que evita el contacto con la sustancia a medir.
Usos: Se emplea para medir y transferir pequeños volúmenes de disoluciones con
exactitud.
TUBO DE ENSAYO
Consiste en un pequeño tubo de vidrio con una punta abierta (que puede poseer una
tapa) y la otra cerrada y redondeada que se construye de cristales resistentes (vidrio
borosilicato), que permite el calentamiento.
Usos: Sirve para contener pequeñas muestras líquidas, realizar reacciones a pequeña
escala, conservación de muestras discretas de reactivos
MICROPIPETA
Es un instrumento de laboratorio automático; los volúmenes que puede captar
volúmenes que pueden variar según el modelo: los más habituales, denominados p20,
p50 y p100, admiten un máximo de 20, 50 y 100 μl respectivamente; utilizan puntas
desechables, de plástico y estériles.
Existen dos tipos de puntas: las amarillas, para pipetear volúmenes pequeños (10 μl),
y las azules, para pipetear volúmenes grandes (80 μl).
Usos: Sirve para medir pequeños volúmenes líquidos en forma exacta La pipetas
automática es un instrumentos de gran precisión, cuyo perfecto funcionamiento,
exactitud y mantenimiento dependen de que se utilice con gran cuidado teniendo en
cuenta varios factores:
- Ajuste cuidadoso al volumen a toma
- Colocar el émbolo al final de su recorrido antes de introducir la punta de la pipeta
en la solución a tomar, evitando así la formación de burbujas en la solución.
- Tener en cuenta los dos topes del recorrido del émbolo. El primer tope (ofrece
ligera resistencia al dedo) indica el volumen exacto a tomar. El segundo tope se
emplea para expulsar la totalidad del líquido. Si se carga la pipeta apretando hasta
el último tope, se toma más volumen del medido, produciéndose un error por
exceso.
- Devolver con suavidad el émbolo a su origen al cargar la solución.
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MICROSCOPIO
Es un instrumento que está formado básicamente por una parte mecánica y una parte
óptica que es capaz de conseguir aumentos considerablemente mayores de un objeto
muy pequeño.
Los principales pasos para el manejo del microscopio son:
- Retirar el microscopio, tomándolo con una mano por el brazo y con la otra mano
por la base, transportar en posición vertical. Apoyarlo sobre la mesa donde se va
a trabajar.
- Limpiar suavemente la parte mecánica del microscopio con un paño
- Verificar el voltaje antes de conectar a la corriente
- Conectar a la corriente y encender
- Sentarse en forma adecuada frente al microscopio
- Abrir el diafragma del condensador
- Subir el condensador ( no tocar el portaobjetos)
- Colocar el objetivo de menos aumento o el más pequeño
- Regular la intensidad de luz
- Bajar la platina y colocar el preparado en la platina
- Centralizar el preparado, hacer coincidir, el tejido con el rayo de luz observando
por un costado
- Enfocar observando con los ojos cerca de los oculares, usando los mandos de
enfoque macro y micrométrico hasta lograr encontrar la imagen
- Para cambiar de aumento se hace rotar el revolver
- Para sacar la preparación, girar el revólver y colocar al objetivo de menor aumento
y retirar la lámina
CENTRÍFUGA DE BAJA VELOCIDAD, DE SOBREMESA O CLÍNICAS
Es una máquina que pone en rotación una muestra para poder separar sus fases
(generalmente una fase sólida de una líquida) a través de la fuerza centrífuga que se
genera, permite la separación de células y líquidos de diferente densidad
BAÑO MARIA
Es un equipo que mantiene la temperatura constante gracias a un baño de agua que
se puede calentar o enfriar según se requiera. Este equipo consta de un recipiente
donde se coloca agua destilada en suficiente cantidad, botón de encendido/apagado
un selector de temperatura, un termostato que controla la temperatura del agua y una
pantalla digital que indica la temperatura.
Para su manejo se procede de la siguiente manera:
- Verificar el voltaje de la corriente eléctrica
- Encender y dejar estabilizar durante 10 minutos como mínimo
- Verificar el nivel de agua destilada
- Colocar los tubos debidamente formados en una gradilla metálica
- Controlar el tiempo de reacción
- Sacar la gradilla con los tubos una vez concluida la reacción
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2. COMPETENCIA(S). -
Al finalizar la práctica el estudiante:
- Reconoce los equipos y materiales utilizados en el laboratorio de bioquímica
- Maneja correctamente los equipos y materiales de vidrio utilizados en el
laboratorio de bioquímica considerando las normas de bioseguridad establecidos
por el manual de bioseguridad de laboratorios
- Desarrolla una actitud y pensamientos críticos en el trabajo.
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS. –
EQUIPOS y MATERIALES
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 Centrífuga 1 Equipo
Para un grupo de
25 estudiantes 2 Microscopio 1 Equipo
3 Baño maría 1 Equipo
Espectrofotómetro o Stat
fax 1 Equipo
Micropipeta de 100 a 1000
ul 1 Pieza
6 Tubos de ensayo 1 Pieza
7 Puntillas para micropipeta 10 Piezas
8 Tubos de eppendorf 2 Piezas
INSUMOS
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 No se requiere
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO. -
- Planificación de la práctica:
Los estudiantes de la práctica se organizarán en grupos de 5 personas.
- Desarrollo de la práctica:
Cada estudiante reconocerá los distintos equipos y materiales de laboratorio
Cada estudiante realizará medidas de diferentes volúmenes de acuerdo con el
siguiente procedimiento:
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PRÁCTICA Nº 2
RECOGIDA DE MUESTRA SANGUÍNEA
1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. -
El agua el componente más abundante en los organismos vivos, en el interior de las
células, en los líquidos extracelulares y en todos los fluidos biológicos.
Un promedio del 65% del peso corporal está constituido por agua dónde los
constituyentes de las células y de los líquidos biológicos se encuentran inmersos en un
medio acuoso.
Es el medio donde se realizan los procesos físicos y químicos de la vida implicados en
el metabolismo de las biomoléculas.
La cantidad de agua total que tiene el ser humano varía en función a la edad y se expresa
en tanto por ciento del peso corporal como se observa en el siguiente cuadro:
Embrión 97%
Feto de tres meses 94%
1 mes 76%
1 año 65%
10 años 62%
20 años 58%
60 años (o más) hombre/mujer 52/46%
Distribución del agua
El agua se distribuye entre el Líquido Intracelular (LIC) y el Líquido Extracelular (LEC).
- El LIC representa del 67%del peso corporal.
- El LEC representa el 33% aproximadamente y está formado por los siguientes
líquidos:
o Líquido Intersticial: Se encuentra entre los espacios vasculares y las células.
Es similar al plasma excepto que contiene muy pocas proteínas.
o Líquido Transcelular: Es una pequeña cantidad especializada de agua que
incluye los líquidos: cefalorraquídeo, intraocular, pleural, peritoneal, sinovial,
orina, sudor, tracto gastrointestinal y el líquido que se escapa de los capilares
debido a procesos inflamatorios.
o Líquido Intravascular o Plasmático: Comprende el agua que se encuentra
dentro de los vasos sanguíneos y representa el 5% del peso corporal total del
ser humano.
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La sangre
La sangre es el tejido más fácilmente biodializable que puede alterarse ante
circunstancias patológicas y fisiológicas que modifican tanto los elementos celulares que
la integran como las sustancias presentes en el plasma.
En el adulto el volumen total de sangre comprende el 8 % de la masa corporal (rango, 7
y 9 %, o aprox. 70 a 80 ml/kg de peso), es decir 4 a 5 litros en la mujer no embarazada
y 5 a 6 litros en el varón.
El pH de la sangre es de 7.40 y su densidad es de 1.055 g/cm3.
La sangre tiene las siguientes funciones:
- Transporte de gases: Oxígeno desde los pulmones hacia los tejidos CO2 desde
los tejidos hacia los pulmones
- Transporte de nutrientes desde el tracto digestivo hacia el hígado y otros tejidos,
e intercambio de nutrientes entre diversos tejidos.
- Transporte de señales hormonales desde las glándulas endocrinas hacia sus
órganos blanco
- Transporte de sustancias de desecho hacia los órganos de eliminación (riñón,
hígado)
- Transporte de calor y regulación de la temperatura
- Metabolismo de hormonas y diversas sustancias biológicas
- Regulación del equilibrio ácido básico
- Regulación del equilibrio hidro salino
- Defensa contra microorganismos
El análisis de sangre es una herramienta de gran utilidad para el diagnóstico clínico
porque la sangre está compuesta por diferentes clases de células y por la parte líquida,
llamada plasma; el plasma contiene varias substancias que están disueltas en el líquido.
La sangre fuera del organismo se coagula porque sus células y proteínas se hacen
sólidas, quedando una parte líquida que se denomina suero que carece de células y de
factores de la coagulación incluyendo la proteína fibrinógeno, pues ésta ha sido
transformada en fibrina insoluble en el proceso de la coagulación.
La porción celular de la sangre consta principalmente de glóbulos rojos, glóbulos blancos
y plaquetas.
El suero puede ser analizado en pruebas bioquímicas y serológicas en cambio la sangre
total obtenida con un anticoagulante sirve para realizar el hemograma y mediante el
análisis de la coagulación se mide la capacidad de la sangre para llevar a cabo la
coagulación.
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2. COMPETENCIA(S). -
Al finalizar la práctica el estudiante:
- Prepara el material necesario para la obtención de muestra sanguínea por
punción venosa y capilar.
- Aplica adecuadamente el procedimiento para la punción venosa o punción
capilar
- Evalúa los cuidados y recomendaciones para realizar la punción venosa y
capilar.
3. MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS. –
EQUIPOS y MATERIALES
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 Centrífuga 1 Equipo Para un grupo de
25 estudiantes 2 Gradilla 2 Pieza
3 Torniquete 13 Piezas
Micropipeta de 100 a 1000
ul 3 Piezas
5 Tubos de hemólisis 30 Piezas
6 Pinza 1 Pieza
7 Puntillas para micropipeta 40 Piezas
8 Tubos de eppendorf 25 Piezas
9 Cola de zorro 2 Piezas
10 Marcador de vidrio 2 Piezas
INSUMOS
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 Cinta adhesiva^1 Pieza Para un grupo de
25 estudiantes 2 Guantes de látex^5 Pares
Jabón antiséptico 1 Pieza
Jeringas estériles
desechables (Con agujas
N.º 21 G para adultos) 30 Piezas
5 Lancetas^30 Piezas
Papel absorbente 2 Piezas
Bolsas con torundas de
algodón
4 Piezas
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4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO. -
- Planificación de la práctica:
Los estudiantes de la práctica se organizarán en grupos de 5 personas.
- Desarrollo de la práctica:
Un estudiante de cada grupo realizará un libro de registro en el que se anotan
los datos del paciente (Número, nombre completo, edad, sexo, procedencia, tipo
de prueba a realizarse)
Cada estudiante realizará la toma de muestra sanguínea por punción capilar o
venosa de acuerdo con el siguiente procedimiento.
TOMA DE MUESTRA DE SANGRE
La sangre periférica constituye el material biológico de elección sobre el cual se realiza
la mayor parte de las investigaciones de laboratorio relacionadas con la química clínica.
La toma de muestra de sangre puede ser venosa, capilar y arterial.
La sangre arterial se utiliza para estudiar los parámetros del equilibrio ácido-base.
La sangre venosa o capilar se utiliza indiferentemente para determinar todos los analitos.
Los instrumentos que se utilicen para la toma de muestra tienen que ser absolutamente
estériles, químicamente inertes (para evitar hemólisis), muy eficientes para la
penetración a través de la piel y poco traumáticos.
La zona de la toma de la muestra tiene que estar limpia, desinfectada con sustancias
eficaces.
OBTENCIÓN DE SANGRE POR PUNCIÓN CAPILAR
SITIO DE PUNCIÓN: Dedo anular en su superficie palmar en el último segmento (yema
del dedo), lóbulo de la oreja, superficie plantar media o lateral del talón.
- Realizar la antisepsia del lugar elegido
- Dejar secar el área
- Puncionar con rapidez y firmeza de tal manera que ingrese toda la punta de
- la lanceta.
- Descartar la primera gota, tomar la sangre que fluye libremente, llenando ¾
partes el capilar sellar con plastilina el otro extremo del capilar
- Realizar hemostasia por compresión
OBTENCIÓN DE SANGRE POR PUNCIÓN POR PUNCIÓN VENOSA
SITIO DE PUNCIÓN: Vena cefálica o mediana cubital, femoral, venas del dorso de la
mano o del dorso del pie
- El personal deberá usar guantes de látex para realizar operaciones de recolección
de sangre y para toda manipulación de sangre, suero, plasma y otros
especímenes.
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- Permitir que la sangre se coagule en el recipiente original tapado hasta que tenga
lugar la coagulación
- Centrifugar la sangre coagulada durante 10 a 20 minutos a 2.500-3.600 rpm
- Transferir el suero mediante el empleo de micropipetas a los tubos de eppendorf
previamente identificados con los datos del paciente
- Las muestras de suero pueden conservarse a 2-8°C durante un máximo de una
semana. Para conservarlas durante períodos más prolongados, congele las
muestras a - 20°C
Proceso de separación de suero o plasma
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRÁCTICA. -
6. MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRÁFICOS. -
7. CUESTIONARIO. -
a. Describa las normas de bioseguridad para el manejo de agujas
desechables
b. Describa los cuidados en la toma de muestra sanguínea
c. Describa los anticoagulantes más utilizados en el laboratorio de Bioquímica
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PRÁCTICA Nº 3
SEMINARIO DE VITAMINAS HIDROSOLUBLES Y VITAMINAS LIPOSOLUBLES
1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO. -
Las vitaminas son compuestos orgánicos que se deben ingerir en la dieta en pequeñas
cantidades para mantener las funciones corporales fundamentales (crecimiento,
desarrollo, metabolismo e integridad celular). Las vitaminas se necesitan en cantidades
mucho más pequeñas que los hidratos de carbono, los lípidos y las proteínas.
Las vitaminas incluyen ocho sustancias del denominado complejo B (tiamina, riboflavina,
piridoxina, niacina, cobalamina, folato, biotina y ácido pantoténico), la vitamina C o ácido
ascórbico, y las vitaminas liposolubles A, D, E y K. Algunas de ellas no son estrictamente
esenciales; así, la vitamina D es sintetizada por la piel expuesta a la luz solar y la niacina
se sintetiza a partir de triptófano. La mayor parte de ellas no se relacionan químicamente
y difieren en sus funciones biológicas.
Todas las vitaminas B, la vitamina C y la vitamina K reducida se requieren como
coenzimas o como componentes de coenzimas y participan en numerosas reacciones
metabólicas. Las otras funciones de las vitaminas son más variadas.
2. COMPETENCIA(S). -
A la conclusión de la práctica el estudiante:
- Analiza las principales funciones de las vitaminas
3. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS. -
EQUIPOS y MATERIALES
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 Data display 1 Equipo Para un grupo de
25 estudiantes
INSUMOS
Ítem DENOMINACIÓN Cantidad Unidad Observaciones
1 Fotocopias casos clínicos 25 Piezas Para un grupo de
25 estudiantes
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5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRÁCTICA. -
6. MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRÁFICOS. -
7. CUESTIONARIO. -
a. Resuelva casos clínicos planteados por el docente
b. Realice un mapa conceptual de las funciones bioquímicas de las vitaminas
c. Llene el cuadro:
Vitamina Forma activa Deficiencia Funciones
Vitamina C
Vitamina D
Vitamina A
Vitamina K
Vitamina B 12
Vitamina B 6
Vitamina B 3
Vitamina B 1
Vitamina B 5
Vitamina B 8
Vitamina B 9
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PRÁCTICA Nº 4
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES Y ALBÚMINA
1. CONOCIMIENTO TEORICO REQUERIDO. -
Las proteínas son polímeros lineales constituidos por los aminoácidos, que se unen entre
sí por medio de enlaces tipo amida denominados enlaces peptídicos.
Las proteínas pueden ser clasificadas en función de aspectos tan diversos como su
composición, su disposición espacial, su función biológica y su localización.
Las proteínas pueden clasificarse en:
- Hísticas o tisulares, son las proteínas de los tejidos.
- Plasmáticas o hemáticas, son las proteínas de la sangre.
Aunque las proteínas tisulares son de gran importancia en el organismo, las localizadas
en la sangre por su gran accesibilidad, proporcionan con facilidad información
importante, por lo tanto, son las más utilizadas en el laboratorio clínico
Existen en el suero humano más de 125 conocidas con múltiples funciones como ser:
Transporte, almacenamiento, balance de fluidos (Agua y electrolitos), regulación del
equilibrio ácido/base, respuesta de fase aguda en procesos de inflamación,
construcción, reparación de tejidos, catalítica, hormonal y de coagulación
Las proteínas totales están constituidas por dos fracciones fundamentales la albúmina y
las globulinas (Que incluye diferentes fracciones proteínicas)
Albúmina
Es la proteína predominante en el plasma ~50% (40-60%) de la proteína total plasmática.
Presenta una concentración de 4-5 g/kg de peso, 35-48 g/L
Su concentración es función del estado nutricional, en particular es sensible a
deficiencias de aminoácidos.
Corresponde al 50% de toda la proteína que sintetiza en el hígado
Su velocidad de síntesis es de 14-15 g diarios y su vida media es de unos 20 días
Es globular compuesta por 585 aminoácidos en una sola cadena polipeptídica con 50%
de α-hélice y 15% de estructura β, posee 17 puentes disulfuro
La albúmina ayuda a conservar la distribución normal de agua ya que produce cerca de
80% del efecto coloido osmótico de las proteínas plasmáticas totales, debido a su alta
concentración y bajo peso molecular.
La albúmina interviene en el equilibrio ácido-básico y se encarga también del transporte
de varias sustancias como son los ácidos grasos, bilirrubina, varias hormonas e incluso
algunos fármacos (sulfonamidas, penicilina G, aspirina, dicumarol).
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Versión: 4.
Vigencia desde: Gestión:
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Muestra: Suero de un paciente que no debe haber consumido alimentos durante un
período de 4 horas previa suspensión de medicamentos que pueden aumentar su
concentración, los cuáles son: Esteroides anabólicos, andrógenos, corticosteroides,
hormona del crecimiento, insulina, fenazo piridina y progesterona o de los medicamentos
que pueden reducir la concentración de proteínas totales como ser: Iones de amonio,
estrógenos, drogas hepatotóxicas y anticonceptivos orales
Para realizar la práctica se debe tener un listado de materiales, reactivos y equipos que
se utilizarán para efectuar el trabajo de laboratorio, con todas las especificaciones
posibles.
4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO. -
(La técnica puede variar de acuerdo con el Kit de proteínas totales y albúmina disponible
para la práctica)
- Planificación de la práctica: Los estudiantes de la práctica se organizarán en
grupos de 5 personas.
- Desarrollo de la práctica:
Cada grupo realizará el siguiente procedimiento:
Marcar tres tubos de ensayo y proceder según el siguiente esquema para la
determinación de proteínas totales y albúmina
- Marcar tres tubos de ensayo para Proteínas totales
Blanco Standard Desconocido
Reactivo 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml
Suero ***** ***** 50 ul
Standard ***** 50 ul *****
Agitar ligeramente e incubar en Baño María a 37 ºC 15 minutos al cabo de los cuales
leer en el espectrofotómetro a 530 nm las respectivas absorbancias
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico en medio
alcalino para dar un complejo de color violeta
Técnica Proti Winner
- Marcar tres tubos de ensayo para Albúmina
Blanco Standard Desconocido
Reactivo 2 ml 2 ml 2 ml
Suero ***** ***** 20 ul
Standard ***** 20 ul *****
Incubar a temperatura ambiente por diez minutos al cabo de los cuales se
desarrollará el color, leer en el espectrofotómetro a 630 nm las respectivas
absorbancias
GUÍA DE LABORATORIO BIOQUÍMICA II
Versión: 4.
Vigencia desde: Gestión:
2/
La albúmina reacciona con el bromo cresolsulfon ftaleína en presencia de un
exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,
Técnica Proti Winner
5. TIEMPO DE DURACIÓN DE LA PRÁCTICA. -
6. MEDICIÓN, CÁLCULOS Y GRÁFICOS. -
a. Expresar en forma ordenada los cálculos efectuados durante la práctica mediante
las siguientes relaciones matemáticas:
b. Registrar todos los valores obtenidos al finalizar el procesamiento de la práctica
c. De acuerdo con los resultados obtenidos, plantear las conclusiones de la práctica
de acuerdo con el siguiente cuadro referencial
PROTEÍNAS TOTALES
VALORES DE REFERENCIA: 6,1 - 7,9 g/dl
Niveles superiores al
normal
monoclonales:
Niveles inferiores al normal
- Mala absorción
- Kwashiorkor
Absorbancia del desconocido
[Proteínas totales] g/dl= ---------------------------------------x [Standard]
Absorbancia del Standard
Absorbancia del desconocido
[Albúmina] g/dl= -------------------------------------- x [Standard]
Absorbancia del Standard
[Globulinas] g/dl= Proteínas Totales - Albúmina
