Análisis microbiológico del agua
José María Obón de Castro
Dpto. Ingeniería Química y Ambiental
Universidad Politécnica de Cartagena
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Análisis microbiológico del agua: Identificación y control de patógenos, Monografías, Ensayos de Química
Este documento proporciona un análisis detallado de los principales microorganismos patógenos que pueden contaminar el agua y los métodos utilizados para su detección e identificación. Abarca temas como las enfermedades causadas por bacterias, virus y parásitos transmitidos a través del agua, los criterios sanitarios para el agua de consumo humano, los métodos de análisis microbiológico (bacterias coliformes, enterococos fecales, clostridium perfringens, bacterias aerobias) y los parámetros de calidad microbiológica del agua para diferentes usos (consumo, riego, recreación, etc.). Una valiosa herramienta para comprender los desafíos y las estrategias de control de la contaminación microbiana del agua, lo que es fundamental para garantizar la salud pública y la sostenibilidad de los recursos hídricos.
Tipo: Monografías, Ensayos
2022/2023
1 / 29
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Análisis microbiológico del agua
José María Obón de Castro
Dpto. Ingeniería Química y AmbientalUniversidad Politécnica de Cartagena
Análisis microbiológico del agua
Se puede definir el análisis microbiológico como el conjunto de operacionesencaminadas a determinar los microorganismos presentes en una muestraproblema de AGUA.
ProteusProteusvulgarisvulgaris
E.E. coli
coli
Análisis microbiológico del agua
BacteriasBacterias
Enfermedad
Agente
Origen bacteriano
Fiebres tifoideas y
paratifoideas
Salmonella typhi,SalmonellaParatyphi A y B
Disentería bacilar
Shigella
Cólera
Vibrio cholerae
Gastroenteritis agudas
y diarreas
Escherichia coli ETCampylobacterYersinia enterocoliticaSalmonella spShigella sp
El interés se centra en los microorganismos patógenos, que son losdiferentes tipos de bacterias
, virus
, protozoos
y otros organismos, que
transmiten enfermedades.
Análisis microbiológico del agua
En
los
países
en
vías
de
desarrollo
las
enfermedades
producidas
por
estos
patógenos son uno de los motivos más importantes de muerte prematura, sobretodo de niños. Normalmente estos microbios llegan al agua en las heces y otrosrestos orgánicos que producen las personas infectadas.
Virus de la hepatitisVirus de la hepatitis
Origen viral
Hepatitis A y E
Virus de la hepatitis A y E
Poliomielitis
Virus de la polio
Gastroenteritis agudas
y diarreas
Virus Nortwalk, Rotavirus,Astrovirus, Calicivirus,Enterovirus, Adenovirus,Reovirus Entamoeba histolytica Giardia lambia Cristosporidium
Disentería amebiana
Origen parasitario
EntamoebaEntamoeba
Análisis microbiológico del agua
Otros tests complementarios
Métodos de análisis: 1. Bacterias coliformes y• Salmonelas• Estafilococos patógenos• Bacteriófagos fecales• Enterovirus• Protozoos• Animálculos (gusanos-larvas), Invertebrados bénticos
Escherichia coli (
E. coli): UNE EN ISO 9308-1:2000.
Enterococos: UNE EN ISO 7899-2:2001.
Clostridium perfringens (incluidas las esporas)
- Enumeración de microorganismos cultivables-Recuento de colonias a 22 °C:
UNE EN ISO 6222:1999.
Las muestras que se tomarán para el análisis deben ser representativas para poder determinar así su calidad microbiológica. Hay normas para la tomade
muestras
de
aguas
según
sus
distintas
procedencias
(grifos,
pozos,
depósitos, lagos, ríos, manantiales, etc.). Para su recogida debe utilizarsefrascos estériles y debe recolectarse cantidades comprendidas entre 500 y1000 ml. En todos los casos los envases se llenarán por completo para excluirel aire. Cuando se estime probable que el agua a analizar contenga trazas decloro, cloramina u ozono, será necesario neutralizar su efecto bactericida en elmomento
del
muestreo.
Para
ello
se
añadirá
una
cantidad
suficiente
de
tiosulfato sódico. Para un volumen de 250 ml son suficientes 0,2 ml de unasolución acuosa al 3% de tiosulfato sódico.
Su análisis debe comenzar antes de que hayan transcurrido
6 h
desde
el momento de la toma de muestras. En circunstancias excepcionales, lasmuestras
pueden
conservarse
a
una
temperatura
de
4ºC
durante
un
periodo máximo de 24 h antes de su análisis.
Toma de muestras para análisis microbiológico
3. PROCEDIMIENTO.
Inocular caldo de peptona con diluciones decimales de la
muestra
de
agua,
expresados
en
,^
,^
Inocular 3 tubos de
lactosa bilis
verde brillante (a los que
- MÉTODO se les añade un tubo de Durham invertido) con 1 ml decada dilución. Incubar a 37ºC (+/-1ºC) durante 24 ó 48h.
El método consiste en desarrollar solo una prueba presuntiva en el que una reacción negativa excluye la presencia del grupo coliforme.
Análisis microbiológico:
Bacterias coliformes
4. LECTURA E INTERPRETACIÓN.
Si se observa crecimiento bacteriano con producción de gas las 24h o antes, la presencia de bacterias coliformesfecales
se
considerará
confirmada,
prosiguiendo
con
el
método del filtro de membrana para conteo.
1. FUNDAMENTO
Las bacterias coliformes de origen fecal son aquellas comprendidas en el grupo anterior (coliformes totales), que además son capaces de fermentar la lactosa, conproducción de ácido y de gas a 44ºC, en un tiempo máximo de 24h.2. MÉTODO
El método consiste en la determinación del nº de coliformes mediante filtración de
volúmenes
determinados
del
agua
a^
analizar
por
filtros
de
membrana
e
incubación
sobre
medio
de
lactosa
enriquecido
(agar
de
lactosa
TTC
con
heptadecilsulfato de sodio) y una temperatura de 44,5ºC (+/-0,2ºC).3. TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO.
Se utiliza la muestra de agua tomada para el análisis de coliformes totales que se encontraba guardada en frigorífico a 4ºC.
Análisis microbiológico: Coliformes fecales
Método de filtración de membrana. (UNE EN ISO 9308-1:2000)
- FUNDAMENTOLos enterococos pueden considerarse como indicadores de contaminación fecal.Sin embargo, algunos enterococos presentes en las aguas pueden proceder deotros
hábitats.
Se
pueden
detectar
y^
cuantificar
las
especies:
Enterococcus
faecalis,
E.
faecium,
E.
durans
y
E.
hirae.
Además,
pueden
determinarse
ocasionalmente
otras
especies
de
Enterococcus
y^
algunas
especies
de
Streptococcus
(en
particular
S.
bovis
y
S.
equinus).
Estas
especies
de
Streptococcus no tienen una supervivencia larga en agua y probablemente nopuedan
determinarse
cuantitativamente.
Como
enterococos
intestinales
se
consideran aquellos microorganismos capaces de reducir el cloruro de 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC) y de hidrolizar la esculina en las condiciones y sobre unosmedios especificos.2. MÉTODOSe utiliza para la determinación del número de enterococos intestinales mediantefiltración de un volumen determinado del agua a analizar a través de filtros demembrana e incubación de los mismos sobre medios de cultivo a temperaturasadecuadas.
Análisis microbiológico: Enterococos fecales(Norma UNE-EN ISO 7899-2: 2001)
1.FUNDAMENTOLos bacterias incluidas en el género
Clostridium tienen morfología bacilar, son
Gram positivas, anaerobias estrictas y capaces de formar esporas. La especie
C.
perfringens está normalmente presente en heces
. Sus esporas son resistentes al
calor,
a^
los
procesos
de
desinfección
y^
a^
los
tratamientos
de
depuración
habituales de las aguas (cloración), por lo que su supervivencia en agua esmayor. La diferenciación de
C. perfringens de otras especies de
Clostridium, se
basa en su capacidad de fermentar la sacarosa con producción de ácido, en suincapacidad de fermentar la celobiosa (debido a la ausencia de
β
-D-glucosidasa)
y en la producción de fosfatasa ácida.2. MÉTODOSe
utiliza
de
método
de
filtración
para
la
determinación
del
número
de
C.
perfringens mediante filtración de un volumen determinado del agua a analizar através de filtros de membrana e incubación de los mismos sobre medios decultivo a temperaturas adecuadas.
Análisis microbiológico: Clostridium perfringens
(incluidas esporas)
- FUNDAMENTOLas bacterias aerobias son todas las bacterias heterótrofas, aerobias o anaerobiasfacultativas,
mesófilas y
psicotróficas capaces de crecer en un medio de agar
nutritivo. Este recuento de colonias es útil para evaluar el estado de los recursos deagua en su origen y la eficacia del proceso de tratamiento de las aguas destinadasal consumo humano e indica la limpieza y el estado de los sistemas de distribución.De
igual
modo,
permite
detectar
cambios
anómalos
en
el
número
de
microorganismos en la red de distribución. Así, todo aumento repentino del númeroobtenido puede advertir de la existencia de un foco de contaminación y requeriríasu inmediata investigación.2. MÉTODOEste método se basa en contar el nº de colonias desarrolladas en una placa demedio de cultivo sólido, en el que se ha sembrado un volumen conocido de aguamuestra, transcurrido un tiempo y una temperatura de incubación determinados.
Análisis microbiológico: Bacterias aerobiasUNE EN ISO 6222: