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Un análisis de datos cinéticos enzimáticos, utilizando diferentes métodos de linealización para determinar los parámetros de michaelis-menten. Se explora el fenómeno de inhibición enzimática y se discuten las posibles soluciones para resolver inconsistencias en los datos. El documento incluye ejemplos prácticos y gráficos para ilustrar los conceptos.
Tipo: Ejercicios
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r [mmol/L*min] 1 0. 2 0. 3 0. 5 0. 7 0. 10 0. 15 0. 20 0. Cs [mmol/L] Ejercicio 1 A partir de una serie de datos de concentracion de sustrato se obtuvieron las respectivas velocidades de reaccion enzimatica utilizando en todos los casos la misma concentracion de enzima siendo los resultados siguientes. Calcular los parametros de Michael Menden empleando las linealizaciones ya vistas. En caso de existir alguna incosistencia en los datos obtenidos, que propones para resolver dicha incosistencia? La inconsistencias puede ser resuleltas viendo los datos inicales Cuando llega a el punto mayor en la velocidad y empieza a bajar, se nota un comportamiento no normal, pues este tiene que ir constante. Cuando ocurre un fenomeno de inhibicion en una reaccion enzimatica empieza a disminuir. como es el caso de nuestro problema 0 5 10 15 20 25 0
f(x) = 0.00672583826429981 x + 0. R² = 0.
Fenomeno de inhibicion de metabolica hace que a alta concentraciones de sustrat vea afectada. Es por eso que se tiene com distintos en los sistemas. Una solucion a esto seria, y quiere ver como se compo lo que se haria es cortar lo estudiarlos por serparados parte para ver los paramet la reaccion normal y la seg datos que incia la inhibicio determianr asi que tipo de competitiva o no competiti Inhibicion competitiva, se ve afectada km que denota la especificidad del la enzima al sustrato. Es no competitiva cuando no hay una especificidad como tal, y se ve afectada la r maxima
especificidad como tal, y se ve afectada la r maxima Dados ya los datos el metodo de langmuir es la que mas se ajusta con los datos experimentales siendo esta la mejor para explicar el suceso. dados los datos no se puede determinar a simple analisis que tipo de inhibicion es, por lo que no hay respuesta para eso
Lineweaver con inhibidor 1/Cs 1/r 3. 0.1 2 -19. 0.06666667 2. 0.05 3.03030303 0.2537749 mmol/L*min -5.02601193 mmol/L a=1/rmax b=km/rmax rmax = km = 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.1 0. 0
1
2
3
f(x) = − 19.8051948051948 x + 3. R² = 0.
Eaddie-Hofstee r/Cs r 0.2 0. -0.1029 0.11 0.22 0. 2.7175 0.1 0.3 -1. 0.09 0. 0.36798528 mmol/Lmin 0.05857143 0.41 0.4499 mmol/Lmin -0.03786569 mmol/L 0.05 0.5 1.2114 mmol/L 0.02666667 0. 0.0165 0. negativa r^2 tampoco es la mejor Langmuir sin inhibidor Eaddie-Hofstee sin inhibidor Cs Cs/r r/Cs 1 5 0. 2 9.09090909 4.6417 0. 3 10 1.5866 0. 5 11.1111111 0. mmol/Lmin 7 17.0731707 0.63027858 mmol/Lmin 0. 10 20 2.9255641 mmol/L 0. a=km/rmax a=rmax b=1/rmax b=-km rmax = rmax = km = km = a=km/rmax b=1/rmax rmax = km = 15 20 25 x − 0.
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0. 0
f(x) = − 1.21143558034183 x + 0. R² = 0.
0 2 4 6 8 10 12 0 5 10 15 20 25 f(x) = 1.58660484596389 x + 4. R² = 0.
0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0. 0
f(x) = − 1.89232077075659 x + 0 R² = 0.
mmol/L*min addie-Hofstee sin inhibidor r
0.22 0. 0.3 -1.
0.41 0.5386 mmol/L*min 0.5 1.8923 mmol/L a=rmax b=-km rmax = km = 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18 0.2 0. f(x) = − 1.89232077075659 x + 0. R² = 0.
addie-Hofstee con inhibidor r 0. 0.5 4.
0.33 0.2567 mmol/L*min 4.9377 mmol/L a=rmax b=-km rmax = km = 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045 0.05 0. f(x) = 4.93769812623584 x + 0. R² = 0.