SISTEMA APTÁMERO-CARBON DOTS PARA LA DETECCIÓN DE LOS
PESTICIDAS CLORPIRIFOS Y PROFENOFOS
En este método se evalúa la capacidad del sistema aptámero-carbon dots para la detección de un
pesticida modelo en agua a diferentes concentraciones, y su aplicabilidad para el posterior
desarrollo de un biosensor de campo.
IDENTIFICACIÓN DE CONDICIONES EN EL PROCESO DE CONJUGACIÓN
APTÁMERO-CARBON DOTS
Según (Ramírez Villegas, 2021) se deben identificar principalmente las condiciones de pH y
temperatura de mejor funcionamiento para el manejo del aptámero, ya que su exposición a pH
extremos y temperaturas elevadas puede desnaturalizar su estructura y producir la pérdida de
capacidad de reconocimiento de la molécula analito.
ESTRATEGIA PARA LA DETERMINACIÓN
El objetivo de este ensayo consistió la detección directa de una molécula moduladora o extintora de
fluorescencia del conjugado aptámero-carbon dots, cuantificando la recuperación de fluorescencia
en cada una de las muestras al entrar en contacto con diferentes concentraciones del analito. Por lo
que se utilizó óxido de grafeno como modulador de fluorescencia, que posee un mecanismo de
extinción de fluorescencia conocido como FRET que se produce a partir de la adsorción de los
ácidos nucleicos presentes en los aptámeros sobre su superficie (Zhou et al., 2020).
PREPARACIÓN DE SOLUCIONES MADRE
Se preparó una solución madre del pesticida clorpirifos a 0.1 ppm en agua ultrapura mediante
diluciones seriadas. De igual forma, se preparó una solución madre de óxido de grafeno a 5000 ppm
en agua ultrapura mediante diluciones seriadas.
ENSAYO DE DETECCIÓN
a) En viales de 600 µL se prepararon las muestras de línea base para el ensayo de detección,
para lo cual se agregaron en viales separados 440 µL de cada uno de los conjugados de las
secuencias de aptámero, se agregaron 10 µL de solución madre de óxido de grafeno para
una concentración final de 100 ppm, se dejaron reposar por 5 minutos antes de agitar en el
vórtex vigorosamente y se dejaron reaccionar por 15 minutos, por último, se agregaron 50
µL de agua ultrapura para completar el volumen final de 500 µL.
b) Se prepararon las muestras para la detección de los pesticidas modelo, en donde se
agregaron 440 µL de cada uno de los conjugados de las secuencias de aptámero en viales
